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猪德尔塔冠状病毒荧光定量PCR检测方法的建立

猪德尔塔冠状病毒荧光定量PCR检测方法的建立

作     者:陈小金 张霞 王玉玲 董志珍 Chen Xiaojin;Zhang Xia;Wang Yuling;Dong Zhizhen

作者机构:天津海关动植物与食品检测中心天津300456 

基  金:国家质量监督检验检疫总局科技计划项目(2016IK249) 

出 版 物:《中国动物检疫》 (China Animal Health Inspection)

年 卷 期:2018年第35卷第9期

页      码:95-100页

摘      要:根据GenBank登录的猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)毒株序列设计特异性引物,建立了检测PDCoV的实时荧光PCR方法。该方法在标准品浓度2.49×10~8~2.49×10~2 copies/μL范围内线性关系良好;特异性试验显示,其他几种常见猪病病毒未见典型扩增曲线;敏感性试验显示,最低检测下限为24.9 copies/μL;重复性试验显示,批内和批间变异系数小于3%。用该方法检测62份猪腹泻粪便样品,相比常规PCR方法,前者的检出率更高;两种方法检测1 168份进境活猪粪便拭子样品,结果均为阴性。结果表明,本研究所建立的方法适用于国内猪场的PDCoV的检测和进境活猪的监控检测,也可作为PDCoV的诊断及分子流行病学调查的技术手段。

主 题 词:猪德尔塔冠状病毒 荧光定量PCR 腹泻 

学科分类:090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D O I:10.3969/j.issn.1005-944X.2018.09.024

馆 藏 号:203368488...

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