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Bcl2过表达重组腺病毒的构建及鉴定

Bcl2过表达重组腺病毒的构建及鉴定

作     者:黄红 王吉利 柴爽 万雷 黄宏兴 Huang Hong;Wang Jili;Chai Shuang;Wan Lei;Huang Hongxinge

作者机构:广州中医药大学广东广州510006 广州中医药大学第三附属医院广东广州510240 

基  金:国家自然科学基金项目(81373653 81302991 81674004 81673786) 广东省科技计划项目(2016A020216024) 广东省自然科学基金项目(S2013040016828 2014A030310127) 

出 版 物:《贵州医药》 (Guizhou Medical Journal)

年 卷 期:2018年第42卷第8期

页      码:909-912页

摘      要:目的构建人B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)过表达载体p ENTER-Bcl2,检测其在人成骨肉瘤细胞中的表达及对细胞活性的影响。方法利用q PCR扩增Bcl2全长c DNA,构建表达载体p ENTER-Bcl2,经测序证实后将其转染至人成骨肉瘤细胞(MG63)中,利用q PCR和Western blot方法检测Bcl2的表达,利用MTT检测细胞活性。结果DNA测序结果显示构建的p ENTER-Bcl2载体表达与实验设计相符;Ad-Bcl2组Bcl2 mRNA表达较NC对照组和空白对照组高(P均<0.01);Ad-Bcl2组Bcl2蛋白表达较NC对照组和空白对照组高(P<0.05,P<0.01);与NC对照组比较,Ad-Bcl2感染细胞活性增强(P<0.05)。结论构建的p ENTER-Bcl2能在MG63细胞中过表达Bcl2;AdBcl2可以提高细胞的活性,这为研究Bcl-2在骨质疏松发生时的分子生物学机制奠定了基础。

主 题 词:过表达人B细胞淋巴瘤-2载体 人成骨肉瘤细胞MG63 构建 

学科分类:1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D O I:10.3969/j.issn.1000-744X.2018.08.003

馆 藏 号:203368597...

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