维药毛菊苣及其易混品菊苣的位点特异性PCR鉴别研究

作     者：程波 何江 郭文倩 地力努尔.吐尔逊江 杨伟俊 CHENG Bo;HE Jiang;GUO Wen-qian;Dilinuer-Tuerxun;YANG Wei-jtm

作者机构：新疆维吾尔自治区药物研究所新疆维吾尔药重点实验室新疆乌鲁木齐830004 新疆医科大学药学院新疆乌鲁木齐830004 

基　　金：新疆维吾尔自治区卫生计生委青年医学科技人才项目(WJWY-201842) 

出 版 物：《中草药》 (Chinese Traditional and Herbal Drugs)

年 卷 期：2018年第49卷第18期

页      码：4393-4398页

摘      要：目的建立维吾尔药毛菊苣及其易混品菊苣的位点特异性PCR鉴别方法。方法采集不同地理区域的毛菊苣及其易混品,提取样品基因组总DNA。通过对其叶绿体rbcL基因片段进行扩增、测序,进行多重序列比对后根据其变异位点设计位点特异性鉴别引物,对其反应条件进行优化,确定检出限,建立位点特异性PCR鉴别方法。结果建立的位点特异性PCR鉴别体系优化结果为30μL反应体系包含Taq酶0.25 U、10×buffer 2.5μL、d NTP 2.0μL、正、反向引物各0.5μL、总DNA 2μL、dd H_2O 22.25μL。适宜的扩增条件为94℃预变性3 min;94℃变性30 s,55℃退火30 s,72℃延伸1 min,32个循坏;最后72℃延伸7 min。对20份毛菊苣与菊苣药材进行扩增,其中毛菊苣能够扩增出约230 bp目的片段条带,而菊苣样品则不能扩增出明显的目的条带。结论建立并优化了毛菊苣及其易混品菊苣位点特异性PCR鉴别技术,能够准确而可靠的达到2种药材的有效鉴别。

主 题 词：毛菊苣 rbcL基因 位点特异性PCR 分子鉴定 总DNA 

学科分类：1008[医学-中药学类] 1006[医学-中西医结合类] 100602[100602] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.7501/j.issn.0253-2670.2018.18.026

馆 藏 号：203369318...