基于PEDV M基因RT-LAMP快速检测方法的建立与应用

作     者：陈希文 尹苗 汪谦 杨勤 杨凤 李莲 罗文涛 周杰珑 马缨 赵洪 CHEN Xi-wen;YIN Miao;WANG Qian;YANG Qin;YANG Feng;LI Lian;LUO Wen-tao;ZHOU Jie-long;MA Ying;ZHAO Hong

作者机构：绵阳师范学院动物应用技术研究所四川绵阳621000 四川铁骑力士集团冯光德实验室四川绵阳621006 西南林业大学生命科学学院云南昆明650224 

基　　金：国家生猪产业技术体系建设基金资助项目(CARS-36-02A) 绵阳市科技局基金资助项目(16N-ZC-01) 绵阳师范学院科技成果培育基金资助项目(PY-2016-A02) 

出 版 物：《中国兽医学报》 (Chinese Journal of Veterinary Science)

年 卷 期：2018年第38卷第9期

页      码：1641-1647页

摘      要：为建立一种快速、灵敏、方便的猪流行性腹泻病毒（porcine epidemic diarrhea virus,PEDV）早期诊断方法,本研究针对PEDV的M基因片段设计了4条引物,对反应体系的时间、温度进行了优化,对试验的特异性和敏感性进行了评估,初步建立了逆转录环介导恒温扩增技术（RT-LAMP）。结果表明,建立的PEDV RT-LAMP方法在65℃恒温下扩增60min,可通过琼脂糖凝胶电泳或SYBR Green I染料肉眼判断结果,灵敏性较普通RT-PCR高100倍。该方法与猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）、猪轮状病毒（PoRV）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）和猪瘟病毒（CSFV）等无交叉反应,具有良好的特异性。采用该RT-LAMP对100份临床疑似发病粪便拭子、小肠组织、初乳样本进行检测,结果较RT-PCR更灵敏。因此,本研究初步建立了可用于临床PEDV检测的RT-LAMP检测方法,为PEDV的临床快速诊断和综合防控提供了一种新的手段。

主 题 词：猪流行性腹泻病毒(PEDV) 逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP) 快速检测 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.16303/j.cnki.1005-4545.2018.09.01

馆 藏 号：203369426...