小反刍兽疫病毒N基因的原核表达

作     者：阮洋 秦峻岭 高玉伟 孙玮 张涛 杨玉姣 杨松涛 王承宇 王铁成 黄耕 夏咸柱 RUAN Yang;QIN Jun-ling;GAO Yu-wei;SUN Wei;ZHANG Tao;YANG Yu-jiao;YANG Song-tao;WANG Cheng-yu;WANG Tie-cheng;HUANG Geng;XIA Xian-zhu

作者机构：吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130118 军事医学科学院军事兽医研究所吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室吉林长春130062 吉林大学畜牧兽医学院吉林长春130062 

基　　金：公益性行业科研专项项目(200903037) 

出 版 物：《动物医学进展》 (Progress In Veterinary Medicine)

年 卷 期：2011年第32卷第3期

页      码：21-25页

摘      要：目的是表达出小反刍兽疫病毒的核蛋白,并鉴定其活性。根据GenBank发表的小反刍兽疫病毒(PPRV)Nigeria 75/1株N基因序列,对其进行基因优化并合成。设计引物,利用PCR的方法扩增PPRV-N基因,将该基因片段定向克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,构建原核表达载体pET-28a-N。阳性质粒转化原核表达宿主菌Transetta(DE3),用IPTG诱导表达并确定表达N基因的最佳诱导时间、温度。通过SDS-PAGE电泳和Western blot分析确定表达蛋白的表达量和活性。扩增出PPRV-N基因,构建的原核表达载体pET-28a-N和原核表达菌,表达了N蛋白,表达蛋白能与PPRV阳性血清发生特异性反应。

主 题 词：小反刍兽疫病毒N基因 原核表达 SDS-PAGE电泳 Western-blot 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 090102[090102] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1007-5038.2011.03.005

馆 藏 号：203371160...