实时荧光定量PCR法检测产气荚膜梭菌

作     者：李林海 石玉玲 陈丽丹 曾兰兰 王露霞 孙朝晖 何洁静 陈建芸 杨永泉 曾桦 岳枫 LI Lin-hai;SHI Yu-ling;CHEN Li-dan;ZENG Lan-lan;WANG Lu-xia;SUN Zhao-hui;HE Jie-jing;CHEN Jian-yun;YANG Yong-quan;ZENG Hua;YUE Feng

作者机构：广州军区广州总医院检验科广州市510010 中山大学附属第二医院检验科广州市510120 广东省武警总队医院检验科广州市510507 

基　　金：全军医药卫生"十一五"重大专项(08Z009) 

出 版 物：《中华实用诊断与治疗杂志》 (Journal of Chinese Practical Diagnosis and Therapy)

年 卷 期：2011年第25卷第7期

页      码：656-659页

摘      要：目的:运用实时荧光定量PCR法检测产气荚膜梭菌,为早期快速诊断气性坏疽提供新方法。方法:以产气荚膜梭菌16s rDNA基因序列为模板,在其保守区域设计特异性引物与探针,将PCR扩增所得产物片段克隆,作为定量检测的标准品,绘制标准曲线。并对荧光定量PCR体系与反应条件进行优化,验证方法的特异性、敏感性、重复性及可行性。结果:实时荧光定量PCR法对产气荚膜梭菌的检测具有高度特异性,与创伤弧菌等24种相关细菌等均无交叉反应;检测灵敏度以纯菌计数达9×102cfu/mL,相当于9 cfu/反应;反应体系有较高稳定性;整个操作过程仅需3 h;300例创伤可疑分泌物样本的荧光定量PCR检测结果与细菌培养结果一致。结论:实时荧光定量PCR法特异、灵敏、快速,适用于产气荚膜梭菌的临床检测及突发事件的批量检测。

主 题 词：实时荧光定量PCR 产气荚膜梭菌 气性坏疽 16s rDNA 

学科分类：100208[100208] 1002[医学-临床医学类] 10[医学] 

馆 藏 号：203371637...