滇龙胆甲羟戊酸激酶基因的克隆与表达分析

作     者：张晓东 李彩霞 赵静 杨娇 王元忠 ZHANG Xiao-dong;LI Cai-xia;ZHAO Jing;YANG Jiao;WANG Yuan-zhong

作者机构：玉溪师范学院资源环境学院中国云南玉溪653100 云南省农业科学院药用植物研究所中国云南昆明650223 

基　　金：国家自然科学基金项目(81260608) 云南省教育厅重点项目(2013Z075) 科技部"十二五"国家科技支撑计划项目(2011BAI13B02-04) 云南省大学生创新项目(201411390001) 

出 版 物：《生命科学研究》 (Life Science Research)

年 卷 期：2015年第19卷第3期

页      码：196-202页

摘      要：甲羟戊酸激酶是甲羟戊酸途径的关键酶。根据滇龙胆转录组甲羟戊酸激酶基因Gr MK序列,设计一对基因特异性引物克隆该基因,并进行序列分析;构建原核表达载体p GEX-4T-1-Gr MK,转入大肠杆菌Rosetta(DE3),重组蛋白在37℃、1.0 mmol/L IPTG诱导下成功表达。生物信息学分析结果表明,Gr MK蛋白为甲羟戊酸激酶家族成员,具有MK蛋白保守结构域:乳糖激酶/高丝氨酸激酶/甲羟戊酸激酶/磷酸甲羟戊酸激酶(GHMP kinase)N端结构域、C端结构域和ATP结合结构域;Gr MK与长春花Cr MK亲缘关系最近.原核表达结果表明,融合蛋白相对分子质量与推断大小一致。组织特异性表达分析结果表明Gr MK基因主要在根中表达.这些结果为Gr MK蛋白结构和功能的研究奠定基础。

主 题 词：滇龙胆 甲羟戊酸激酶 基因克隆 表达分析 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.16605/j.cnki.1007-7847.2015.03.002

馆 藏 号：203372682...