小鼠Smad6基因RNAi慢病毒载体的构建与鉴定

作     者：刘铮 代继宏 符州 冯琳琳 LIU Zheng;DAI Ji-hong;FU Zhou;FENG Lin-lin

作者机构：儿童发育疾病研究省部共建教育部重点实验室 重庆医科大学儿童医院呼吸中心 儿科学重庆市重点实验室重庆400014 

基　　金：重庆市科委自然科学基金资助(项目编号:CSTC2007BB0268) 

出 版 物：《生物学杂志》 (Journal of Biology)

年 卷 期：2011年第28卷第5期

页      码：19-23页

摘      要：构建小鼠Smad6基因RNA干扰(RNAi)慢病毒载体,有效沉默骨髓树突状细胞(BMDC)的Smad6基因表达,为构建骨髓致耐受DC用于哮喘等自身免疫疾病的研究。设计小鼠Smad6 shRNA序列,合成、退火,得到双链DNA,与经酶切后的Psih1-H1-copGFP shRNA Vector载体连接产生LV-shSmad6慢病毒载体,并测序鉴定。转染293TN细胞,包装产生慢病毒,测定滴度。感染小鼠骨髓树突细胞,检测Smad6基因的表达状况成功构建Smad6 shRNA的慢病毒载体LV-shSmad6。包装慢病毒,并显著抑制Smad6 mRNA水平及蛋白水平的表达。成功构建出小鼠Smad6基因shR-NA慢病毒载体,为后期研究Smad6基因在哮喘发病机制及新治疗方法提供了稳定的转染细胞载体。

主 题 词：Smad6 RNA干扰 慢病毒载体 哮喘 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.3969/j.issn.2095-1736.2011.05.019

馆 藏 号：203372736...