基于恒温隔绝式荧光PCR技术的猪流行性腹泻病毒检测方法的建立及应用

作     者：于新友 李天芝 吴信明 王金良 YU Xinyou;LI Tianzhi;WU Xinming;WANG Jinliang

作者机构：山东绿都生物科技有限公司山东滨州256600 山东省滨州畜牧兽医研究院山东滨州256600 

基　　金：山东省自然科学基金(ZR2016CM35) 

出 版 物：《畜牧与兽医》 (Animal Husbandry & Veterinary Medicine)

年 卷 期：2018年第50卷第10期

页      码：78-81页

摘      要：为建立猪流行性腹泻病毒（porcine epidemic diarrhea virus,PEDV）快速检测方法,参照Gen Bank中PEDV的N基因序列,设计引物及TaqMan探针,优化反应条件,建立了快速检测PEDV的荧光RT-PCR方法,并验证该法的敏感度、特异性和重复性。结果显示：该方法最佳反应体系为上游引物各1.5μL,下游引物各1.8μL,探针0.7μL,酶1μL,缓冲液12.5μL,模板2μL,补足DEPC水至25μL,获得的标准曲线方程为Ct=-3.15×lg拷贝数＋31.72,检测PEDV的敏感度可达0.32 TCID50/100μL,特异性好,对其他猪常见病毒检测结果均为阴性。结果表明：该方法适合猪流行性腹泻快速检测,为该病的诊断和防控奠定了基础。

主 题 词：猪流行性腹泻病毒 检测 荧光RT-PCR 

学科分类：090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

馆 藏 号：203372783...