猪繁殖与呼吸综合征病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用

作     者：杨峰 周宏超 许信刚 张为民 张琪 YANG Feng;ZHOU Hong-chao;XU Xin-gang;ZHANG Wei-min;ZHANG Qi

作者机构：西北农林科技大学动物医学院陕西杨凌712100 

基　　金：西安市农业科技创新计划研发类(2017050NC/NY010-2) 杨凌示范区农业科技示范推广能力提升项目(TS-2016-12) 杨凌示范区农业科技计划项目(2018NY-10) 

出 版 物：《动物医学进展》 (Progress In Veterinary Medicine)

年 卷 期：2018年第39卷第9期

页      码：25-29页

摘      要：为建立猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的一种特异、灵敏、量化且耗时短的检测方法,通过设计1对PRRSV ORF7基因的引物,建立Eva Green染料的实时荧光定量PCR(real-time PCR)的检测方法,对该方法的特异性、灵敏性和重复性进行检验,并检测PRRSV疑似感染的临床病料。结果显示,所建立的real-time PCR检测方法标准曲线的线性相关系数R2=0.999,具有良好的线性关系;与传染性胃肠炎病毒(PEDV)、猪瘟病毒(CSFV)、伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)无交叉反应,特异性强;与常规RT-PCR检测方法相比,灵敏度提高100倍;重复试验表明变异系数系数在1%以下,重复性良好。对27份临床样品进行检测,结果比常规PCR多检出3份阳性。说明建立的real-time PCR检测方法在特异性、灵敏度、重复性方面均相比良好,可用于临床PRRSV的检测。

主 题 词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 实时荧光定量PCR 检测 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1007-5038.2018.09.005

馆 藏 号：203373238...