Ⅰ、Ⅱ型胶原蛋白在不同损伤类型动物模型椎间盘组织内的含量变化规律

作     者：赵小丹 刘浩 黄富国 刘熹 邓宇骁 ZHAO Xiaodan;LIU Hao;HUANG Fuguo;LIU Xi;DENG Yuxiao

作者机构：四川大学华西医院骨科成都610041 

基　　金：教育部高等学校博士学科点专项科研基金(20110181120041) 

出 版 物：《华西医学》 (West China Medical Journal)

年 卷 期：2018年第33卷第9期

页      码：1146-1152页

摘      要：目的通过对损伤动物模型椎间盘软骨终板细胞内Ⅰ、Ⅱ型胶原m RNA的水平进行定量测定,明确椎间盘软骨细胞在椎间盘损伤后纤维化修复过程中的细胞学功能变化规律。方法建立兔椎间盘损伤模型,选用健康新西兰大白兔40只,随机分为纤维环穿刺组、上位软骨终板单次穿刺组、上下位软骨终板多次穿刺组、假手术对照组,分别于建模手术术后第2天及第2、8、12、24周在每组中随机选取2只实验动物获取椎间盘标本,逆转录聚合酶链反应测定椎间盘软骨终板细胞Ⅰ、Ⅱ型胶原m RNA水平。首先提取椎间盘软骨终板组织的RNA,通过核酸测定仪测定RNA浓度及RNA浓度与蛋白浓度比值,采用Revertaid M-Mulv逆转录酶进行逆转录,设计Ⅰ、Ⅱ型胶原引物,建立聚合酶链反应体系,用0.5×TBE电泳缓冲液配制2%的琼脂糖凝胶电泳(120 V,40 min),紫外灯下观察扩增结果,测定不同电泳条带的灰度值。结果术后各手术组Ⅰ型胶原m RNA水平在术后8周后呈现进行性上升的趋势,上升的幅度与损伤程度相关。Ⅱ型胶原的m RNA水平在纤维环穿刺组及上位终板单次穿刺组中开始2周内出现一过性的上升,随后开始进行性下降;而在上下位软骨终板多次穿刺组则从术后开始一直呈现下降的趋势。结论损伤椎间盘髓核组织内软骨细胞Ⅰ型胶原的合成量随时间呈现持续升高的趋势,而Ⅱ型胶原的合成量在小幅升高后开始进行性下降。Ⅰ、Ⅱ型胶原在损伤椎间盘软骨细胞内的形成变化规律有别于自然退变。

主 题 词：损伤 软骨终板 Ⅰ、Ⅱ型胶原 逆转录聚合酶链反应 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100210[100210] 10[医学] 

D　O　I：10.7507/1002-0179.201807150

馆 藏 号：203373464...