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猪流产衣原体实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用

猪流产衣原体实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用

作     者:周丹娜 李文浩 阮征 刘威 郭锐 杨克礼 段正赢 袁芳艳 刘泽文 陈文杰 孟丽 焦祖武 田永祥 ZHOU Dan-na;LI Wen-hao;RUAN Zheng;LIU Wei;GUO Rui;YANG Ke-li;DUAN Zheng-ying;YUAN Fang-yan;LIU Ze-wen;CHEN Wen-jie;MENG Li;JIAO Zu-wu;TIAN Yong-xiang

作者机构:农业部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室湖北武汉430064 湖北省农业科学研究院畜牧兽医研究所湖北武汉430064 武汉市动物疫病预防控制中心湖北武汉430016 

基  金:"十三五"国家重点研发计划(2016YFD0500906) 湖北省农业科技创新中心项目(2016-620-000-001-026) 

出 版 物:《动物医学进展》 (Progress In Veterinary Medicine)

年 卷 期:2018年第39卷第9期

页      码:1-5页

摘      要:为建立一种快速、准确检测猪流产衣原体(Chlamydophila abortus,***)实时荧光定量PCR检测方法,根据***主要外膜蛋白(MOMP)的基因序列设计1对引物和1条分子探针(FAM和Dabycl标记),以构建的重组质粒作为标准阳性质粒,通过筛选和条件优化,建立了猪流产衣原体实时荧光定量PCR诊断方法。重复性、特异性及敏感性试验结果显示,重组质粒为标准品建立的标准曲线在1.0×10~2拷贝/μL^1.0×10~7拷贝/μL内具有良好的线性关系,其相关系数为0.993 2,扩增效率为94.7%,灵敏度达到1.0拷贝/μL,批间批内变异系数(CV)为0.022%~0.051%,建立的方法可有效区分流产衣原体、猪支原体、猪衣原体、肺炎衣原体及猪蓝耳病毒等病原,具有良好的临床应用前景。

主 题 词:猪流产衣原体 实时荧光定量PCR momp基因 诊断方法 

学科分类:090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D O I:10.3969/j.issn.1007-5038.2018.09.001

馆 藏 号:203373489...

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