自身抗原PDC-E2融合蛋白在大肠杆菌中的表达及免疫学鉴定

作     者：周晔 姚定康 陈燕 蒋天舒 蒋廷旺 吴传勇 陈波 仲人前 邓安梅 ZHOU Ye;YAO Ding-Kang;CHEN Yan;JIANG Tian-Shu;JIANG Ting-Wang;WU Chuan-Yong;CHEN Bo;ZHONG Ren-Qian;DENG An-Mei

作者机构：第二军医大学长征医院实验诊断科全军临床免疫中心上海200003 

基　　金：国家自然科学基金(30471616) 上海市重大科技攻关基金(04DZ19116) 上海市重点科研支撑条件项目(051409012) 上海市青年科技启明星计划(QMX01423)资助 

出 版 物：《中国免疫学杂志》 (Chinese Journal of Immunology)

年 卷 期：2007年第23卷第3期

页      码：267-268,280页

摘      要：目的用基因工程的方法克隆表达丙酮酸脱氢酶复合体E2(PDC-E2)融合蛋白,以用于人原发性胆汁性肝硬化(PBC)的早期发现和临床诊断。方法针对PDC-E2的cDNA序列设计引物,从正常人的淋巴细胞中提取RNA,通过反转录PCR方法扩增得到相应的基因片段,经测定序列验证后插入表达载体pET28a(+),构建重组表达载体pET28a(+)-PDC-E2,转化大肠杆菌BL21(DE3)后诱导表达蛋白质。表达蛋白经SDS-PAGE、Western blot鉴定。结果经核苷酸序列测定和酶切鉴定结果表明,成功地构建了PDC-E2重组质粒。IPTG诱导表达后,获得PDC-E2融合蛋白。经免疫学鉴定,重组抗原片段具有抗线粒体抗体二亚型(AMA-M2)的免疫原性。结论获得PBC特异性靶抗原的多肽片段,为PBC的早期发现和临床诊断提供有力工具。

主 题 词：PBC 自身抗原 PDC-E2 重组融合蛋白 

学科分类：1001[医学-基础医学] 100102[100102] 10[医学] 

核心收录：

馆 藏 号：203373753...