基于分子生物学特异性扩增的方法鉴别菲牛蛭

作     者：过立农 刘杰 杨宝 昝珂 郑健 马双成 马宁 李昀铮 Guo Linong;Liu Jie;Yang Bao;Zan Ke;Zheng Jian;Ma Shuangcheng;Ma Ning;Li Yunzheng

作者机构：中国食品药品检定研究院北京100050 中央民族大学北京100081 太原市食品药品检验所太原030000 松原市食品药品检验所松原138000 

基　　金：中药饮片质量保障体系研究(一)(编号201507002) 

出 版 物：《中国药事》 (Chinese Pharmaceutical Affairs)

年 卷 期：2018年第32卷第9期

页      码：1239-1244页

摘      要：目的:通过DNA条形码鉴定和建立特异性引物扩增的方法,有效区分菲牛蛭与其他水蛭品种。方法:通过聚合酶链式反应(PCR)对水蛭样品的COI序列进行扩增,利用MEGA 6.06软件通过建树法进行NJ树聚类分析,针对菲牛蛭素的编码基因序列、利用Primer Premier 5软件进行引物设计,对经设计、合成的8对引物通过PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳实验进行筛选,并确定特异性引物的最佳退火温度。结果:通过COI序列的NJ树聚类分析可以确定20批水蛭样品中的9批菲牛蛭样品,经过Primer Premier 5软件进行引物设计共选出8对引物进行合成,通过PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳预实验筛选出引物7、为最佳实验引物,且确定了引物7的最佳退火温度为49℃。结论:通过COI序列的DNA条形码研究,确定了样品中的菲牛蛭,通过特异性引物PCR扩增和电泳检测,有效地将菲牛蛭与其他水蛭样品进行区分,为菲牛蛭的分子生物学鉴定方法提供了参考。

主 题 词：菲牛蛭 聚合酶链式反应(PCR) COⅠ DNA条形码 特异性扩增 

学科分类：1007[医学-药学类] 100704[100704] 10[医学] 

D　O　I：10.16153/j.1002-7777.2018.09.014

馆 藏 号：203377613...