Nogo受体特异性RNA干扰载体合成

作     者：刘百峰 徐盛明 张涛 吕碧涛 袁文 何成 

作者机构：第二军医大学附属长征医院骨科上海200003 上海第六医院骨科 第二军医大学神经生物教研室 

出 版 物：《脊柱外科杂志》 (Journal of Spinal Surgery)

年 卷 期：2006年第4卷第5期

页      码：284-287页

摘      要：目的构建表达Nogo受体(NgR)特异性siRNA199的重组质粒。方法按照Elbashir等设计原则和siRNA表达载体的要求,在合成、筛选出基因沉默效率较高的siRNA199基础上,设计带有BamH I、HindⅢ酶切黏性末靖、终止识别序列和LOOP环的shRNA,并将其克隆入载体pRNAT-U6．1/Neo,构建成NgR特异siRNA199重组质粒,然后进行酶切鉴定及基因测序。结果设计的shRNA成功克隆人载体pRNAT-U6．1/Neo,构建成NgR特异siRNA199重组质粒,酶切鉴定及基因测序表明设计序列完全相符,目的基因序列准确无误。结论重组质粒构建成功,为构建病毒载体及观察重组质粒抑制大鼠NgR基因的表达对脊髓损伤的修复作用奠定了基础。

主 题 词：髓鞘 细胞表面受体 神经再生 脊髓损伤 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100210[100210] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1672-2957.2006.05.008

馆 藏 号：203378375...