大鼠生精细胞体外培养条件的研究

作     者：刘锋 檀大羡 邹彦 邓志华 王植柔 

作者机构：广西医科大学第三附属医院生殖医疗中心南宁530031 广西壮族自治区计生委计划生育辅导站 广西医科大学肿瘤医院泌尿肿瘤外科 

基　　金：广西壮族自治区科技厅(桂科基0141014) 南宁科技局(200113D)资助课题 

出 版 物：《广西医科大学学报》 (Journal of Guangxi Medical University)

年 卷 期：2007年第24卷第1期

页      码：40-43页

摘      要：目的:寻找一个最适合生精细胞体外培养的培养体系,为进一步培养人类生精细胞提供技术基础。方法:用单一酶-研磨-Percoll法制备15d龄雄性大鼠生精细胞混悬液用于体外培养。①设计两种不同的培养条件:DMEM/F12和改良人类输卵管液(HTF)作为基础培养液,分为两组。每组根据添加不同浓度的激素分为6小组。添加的睾酮(T)和FSH浓度分别为:对照组H0(T1μmol/L,FSH0IU/L)、H1组(T1μmol/L,FSH10IU/L)、H2组(T1μmol/L,FSH25IU/L)、H3组(T1μmol/L,FSH50IU/L)、H4组(T1μmol/L,FSH100IU/L)、H5组(T0μmol/L,FSH50IU/L)。②通过BRDU标记和流式细胞仪检测所有实验的生精细胞倍体的变化来判断其发育,进一步确认本研究使用培养条件的可靠性。结果:在生精细胞与支持细胞共培养过程中以改良人类输卵管液作为基础培养液,添加T1μmol/L,FSH50IU/L或100IU/L都适宜生精细胞体外培养;另通过BRDU标记及流式细胞仪检测均表明,在本研究条件下体外培养生精细胞能从初级精母细胞阶段分化到精子细胞阶段。结论:改良人类输卵管液作为基础培养液,添加浓度为50IU/L或100IU/L的FSH及T1μmol/L,最适合生精细胞的体外成熟培养。

主 题 词：生精细胞 体外培养 大鼠 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 1002[医学-临床医学类] 07[理学] 100210[100210] 071002[071002] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1005-930X.2007.01.014

馆 藏 号：203378486...