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鸡PPAR-γ基因表达载体构建及抗血清制备

鸡PPAR-γ基因表达载体构建及抗血清制备

作     者:王娉 王启贵 李辉 张富春 WANG Ping;WANG Qi-gui;LI Hui;ZHANG Fu-chun

作者机构:新疆大学生命科学与技术学院新疆生物资源基因工程重点实验室乌鲁木齐830046 东北农业大学动物科学技术学院哈尔滨150030 

基  金:中国博士后科学基金(2005037018) 新疆生物资源基因工程重点实验室开放基金(2005XJDX004) 

出 版 物:《畜牧兽医学报》 (ACTA VETERINARIA ET ZOOTECHNICA SINICA)

年 卷 期:2007年第38卷第7期

页      码:651-656页

摘      要:为构建鸡PPAR-γ基因的原核和真核表达载体并制备鸡PPAR-γ的抗血清,根据鸡PPAR-γ基因cDNA序列设计一对引物,采用RT-PCR的方法扩增鸡PPAR-γ基因的cDNA片段并将其分别插入到原核表达载体pGEX-4T-1和真核表达载体pcDNA3中;进而诱导重组原核表达载体pGEX-4T-1/PPAR-γ在大肠杆菌BL21中表达;同时利用重组真核表达载体pcDNA3/PPAR-γ免疫注射小鼠使其产生免疫应答。SDS-PAGE结果显示pGEX-4T-1/PPAR-γ在大肠杆菌BL21中得到了高效的表达。ELISA和Western blot结果表明,pcDNA3/PPAR-γ免疫小鼠产生了效价较高和特异性较强的抗体。本研究所构建的真核表达载体pcDNA3/PPAR-γ为在细胞水平上研究鸡PPAR-γ基因超表达提供了有力的工具;所获得的重组蛋白和抗血清为在蛋白水平上研究鸡PPAR-γ基因的功能奠定了基础。

主 题 词: PPAR-γ基因 载体构建 抗血清 

学科分类:0905[农学-林学类] 09[农学] 090501[090501] 

核心收录:

D O I:10.3321/j.issn:0366-6964.2007.07.006

馆 藏 号:203378550...

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