RNAi沉默HIF-1α基因抑制滋养细胞TGF-3β表达的实验研究

作     者：吴维光 陈亚琼 曹秀琴 

作者机构：武警医学院附属医院妇产科天津300162 

出 版 物：《中国优生与遗传杂志》 (Chinese Journal of Birth Health & Heredity)

年 卷 期：2009年第17卷第1期

页      码：18-20页

摘      要：目的构建缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α)基因的短发夹状干扰RNA(short hair-pin RNA,shRNA)表达质粒,探讨其在低氧条件下对BeWo细胞转化生长因子3β(transforming growth factor3β,TGF-3β)基因表达的抑制作用。方法根据小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)设计原则,针对HIF-1α基因设计并合成两条寡聚DNA片段,退火后克隆入pSilencer2.1-U6-neo质粒,应用脂质体将重组质粒转染BeWo细胞。缺氧培养后,应用Western blot法检测滋养细胞HIF-1α和TGF-3β蛋白表达水平,应用real time PCR法检测滋养细胞HIF-1α和TGF-3βmRNA表达水平。结果成功构建HIF-1α的shRNA真核表达载体,转染BeWo细胞。低氧条件下,细胞HIF-1α蛋白和mRNA表达下降;同时细胞TGF-3β蛋白和mRNA表达也降低。结论构建的HIF-1α基因shRNA表达质粒在低氧条件下明显抑制滋养细胞TGF-3β基因的表达。

主 题 词：缺氧诱导因子1α 转化生长因子3 βRNA干扰 BeWo细胞 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100211[100211] 10[医学] 

D　O　I：10.13404/j.cnki.cjbhh.2009.01.021

馆 藏 号：203379022...