猪囊尾蚴抗原基因6H的克隆、表达及鉴定

作     者：汪秀琴 包怀恩 沈继龙 姚涌 WANG Xiu-qin;BAO Huai-en;SHEN Ji-long;YAO Yong

作者机构：贵阳医学院病原生物学教研室贵州贵阳550004 安徽医科大学人兽共患病研究所安徽合肥230032 安徽医科大学病原生物学教研室安徽合肥230032 

基　　金：安徽省高等学校青年科研资助项目(2002jq136) 

出 版 物：《中华疾病控制杂志》 (Chinese Journal of Disease Control & Prevention)

年 卷 期：2009年第13卷第3期

页      码：317-319页

摘      要：目的为寻找猪囊尾蚴病新的免疫学候选诊断分子奠定基础。方法设计合成引物,用PCR法从cDNA文库中扩增出猪囊尾蚴抗原6H基因编码序列,将其克隆入PMD-18T载体,然后在原核表达载体PET-28a中亚克隆,用IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blot观察表达结果。结果用PCR法扩增出一条大小约774bp的特异性片段,克隆质粒PMD-18T-6H和原核表达质粒PET-28a-6H作BamHⅠ和XhoⅠ双酶切和以重组质粒为模板进行PCR扩增,均可获得一条与PCR产物一致的DNA片段。诱导表达后,经SDS-PAGE可见一条约33kDa大小的融合蛋白条带,Western blot结果显示其可与猪囊尾蚴病人血清起反应。结论本实验成功地克隆了猪囊尾蚴抗原6H编码基因,并在原核细胞中进行了表达及鉴定,为进一步免疫诊断研究奠定了基础。

主 题 词：寄生虫病 抗原 基因克隆 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 1001[医学-基础医学] 100201[100201] 10[医学] 

馆 藏 号：203379333...