用无选择标记的转基因烟草表达胸腺素α1(Tα1)

作     者：芦丽亚 宋维 游晓慧 江婷 赵凌侠 LU Li-ya SONG Wei YOU Xiao-hui JIANG Ting ZHAO Ling-xia (Plant Biotechnology Research Center,School of Agriculture and Biology,Shanghai Jiao Tong University,Shanghai 200240,China)

作者机构：上海交通大学农业与生物学院植物生物技术研究中心上海200240 

基　　金：国家"863"计划(2007AA100503) 国家自然科学基金(30871722) 上海市科技攻关重大专项(03DZ19310 073158202)资助项目 

出 版 物：《中国生物工程杂志》 (China Biotechnology)

年 卷 期：2010年第30卷第3期

页      码：1-8页

摘      要：胸腺素α1(thymosin α1,Tα1)作为免疫调节剂在T细胞成熟、分化和功能发挥方面扮演着重要角色,临床主要被用于免疫缺陷、病毒感染和自身免疫性疾病(HBV、HCV、HIV和癌症等)的治疗。由于组织提取Tα1原料限制、化学合成价格昂贵和传统表达系统(原核或转基因动物)存在安全隐患,使Tα1临床应用受限。用烟草表达Tα1,首先按植物偏爱密码子设计合成tα1基因(124bp)并重组串联成4×tα1,构建植物双元表达载体p35s∷4×tα1(含twinT-DNAs),用农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导法转化烟草。PCR和Southern blot结果证实获得了14转基因烟草,并发现靶基因4×tα1与筛选基因nptII在转基因烟草T0代基因组中发生了分别整合。对177株T1代转基因烟草检测,获得了2株仅整合4×tα1而无筛选标记nptII的植株。ELISA结果显示,4×Tα1在转基因烟草叶片中的表达量介于180.46(81#)～756.87ng/***(86#),Western blot证实植物源4×Tα1具有免疫活性。MTT实验结果显示,植物源的4×Tα1蛋白具有促进BALB/c鼠脾淋巴细胞增殖的功能,为用安全植物表达系统生产包括Tα1在内的药用蛋白提供重要参考。

主 题 词：胸腺素α1 转基因烟草 生物活性 无选择标记 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.13523/j.cb.20100301

馆 藏 号：203379646...