羊布鲁菌外膜蛋白Omp25d的原核表达、鉴定及纯化

作     者：张蕾 张芳琳 张亮 王海涛 胡刚 吴兴安 徐志凯 白文涛 ZHANG Lei;ZHANG Fang-lin;ZHANG Liang;Wang Hai-tao;Hu Gang;WU Xing-an;XU Zhi-kai;BAI Wen-tao

作者机构：第四军医大学微生物学教研室西安710032 

基　　金：军队科技攻关项目(06G091) 国家自然科学基金(30901281)资助 

出 版 物：《科学技术与工程》 (Science Technology and Engineering)

年 卷 期：2010年第10卷第25期

页      码：6146-6149,6154页

摘      要：研究羊布鲁菌外膜蛋白Omp25d基因的克隆,原核表达,以及纯化,根据羊布鲁菌M5株外膜蛋白Omp25d蛋白基因序列设计引物,扩增出大小约为650bp的目的基因片断,克隆入融合表达载体pGEX-4T-1,构建重组质粒pGEX-4T-1-Omp25d。在大肠杆菌中将该蛋白表达并用亲和层析法纯化。用Western-blot分析方法鉴定GST-Omp25d蛋白。结果成功地构建了pGEX-4T-1-Omp25d原核表达载体并在大肠杆菌中表达了Omp25d基因,纯化后所获得的融合蛋白与兔抗布鲁菌血清发生特异性反应。表明研究成功构建了pGEX-4T-1-Omp25d元和表达载体,并且在大肠杆菌中进行表达,纯化的融合蛋白具有良好的免疫原性。

主 题 词：羊布鲁菌 Omp25d蛋白 克隆 表达 纯化 

学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1671-1815.2010.25.006

馆 藏 号：203379838...