奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌和大肠杆菌二重PCR检测方法的建立

作     者：聂培 易驰喆 贺婷 陈亚明 刘平 侯小露 杜玉兰 何宝祥 

作者机构：广西大学兽医内科学实验室南宁530005 

基　　金：国家自然科学基金(批准号:30960294) 广西科技攻关(桂科攻10100014-3) 广西教改项目(编号GXTSZY141) 广西大学大学生创新(SYJN20121714) 

出 版 物：《广西畜牧兽医》 (Guangxi Journal of Animal Husbandry & Veterinary Medicine)

年 卷 期：2013年第29卷第1期

页      码：11-15页

摘      要：金黄色葡萄球菌和大肠杆菌是引起奶牛乳房炎的主要病原菌。选取金黄色葡萄球菌的Nuc基因和大肠杆菌16S-23SrRNA基因作为扩增靶基因序列,设计两对特异性引物。通过正交试验优化反应条件建立二重PCR检测体系,优化结果表明二重PCR扩增出两条特异性条带,大小与实验设计的249bp(金黄色葡萄球菌)和375bp(大肠杆菌)相符,而对其它奶牛乳房炎主要病原菌的PCR扩增结果均为阴性;敏感性测定结果表明,该二重PCR技术能同时检出14.6pg的金黄色葡萄球菌模板和26.0pg的大肠杆菌模板。使用该二重PCR检测29份临床奶样,发现其中17份携带相关基因,并分离得到相关致病菌。

主 题 词：二重PCR 金黄色葡萄球菌 大肠杆菌 

学科分类：090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1002-5235.2013.01.004

馆 藏 号：203380954...