马立克氏病病毒648株囊膜糖蛋白gI基因的克隆和表达的研究

作     者：丁家波 崔治中 徐建生 韦平 卢银华 赵文明 韩凌霞 吉荣 DING Jiabo;CUI Zhizhong;XU Jiansheng;WEI Ping;Lu YinHua;ZHAO Wenming;HAN Lingxia;JI Rong

作者机构：扬州大学畜牧兽医学院扬州225009 山东农业大学动物科技学院泰安271018 广西大学动物科技学院南宁530005 

基　　金：国家"86 3计划资助项目! (课题号 :10 1_5 2_0 3_0 2 ) 

出 版 物：《中国预防兽医学报》 (Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine)

年 卷 期：2001年第23卷第1期

页      码：7-10页

摘      要：根据马立克氏病病毒 (MDV)强毒株GA的基因序列 ,设计和合成一对引物 ,以特超强毒 6 48株基因组DNA为模板 ,通过PCR技术 ,扩增其囊膜糖蛋白gI基因阅读框 (ORF)中 ,除去其N_端编码疏水区的 16 5个碱基对 (bp)以外的其余部分 ;将PCR产物按正确的阅读框架定向克隆到表性载体pGEX_6P_1中谷胱甘肽转移酶 (GST)基因的下游 ;将重组质粒转化进大肠杆菌BL2 1株 ,在 1.0mMIPTG浓度和 30℃的条件下诱导 ,gI_GST基因融合蛋白获得了理想的表达 ;经聚丙烯酰胺凝脉电泳 ,West ern_blot试验 ,验证其表达的融合蛋白产物大小为预期的 6 3kD。将表达产物回收后免疫小鼠 ,所得抗血清可与MDV感染的鸡胚成纤维细胞 (CEF)在免疫荧光试验 (FA)中呈细胞膜阳性染色。试验结果表明 ,在大肠杆菌中表达的 6

主 题 词：马立克氏病病毒 gI基因 囊膜糖蛋白 基因克隆 基因表达 

学科分类：090603[090603] 090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1008-0589.2001.01.003

馆 藏 号：203381396...