^(99m)Tc标记的CXCR4小干扰RNA对人乳腺癌目的基因表达的影响

作     者：姜廷军 李丽 曹学良 栾厦 付鹏 赵长久 JIANG Ting-jun;LI Li;CAO Xue-liang;LUAN Sha;FU Peng;ZHAO Chang-jiu

作者机构：哈尔滨医科大学附属第四医院核医学科黑龙江哈尔滨150001 黑龙江省农垦总局总医院PET-CT中心黑龙江哈尔滨150088 哈尔滨医科大学附属第一医院核医学科黑龙江哈尔滨150001 

基　　金：黑龙江省自然科学基金面上项目(H2015066) 

出 版 物：《哈尔滨医科大学学报》 (Journal of Harbin Medical University)

年 卷 期：2018年第52卷第3期

页      码：206-211页

摘      要：目的探讨以靶向趋化因子受体4(CXCR4)为靶点的^(99m)Tc标记小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)对人乳腺癌MDA-MB-231细胞目的基因表达的影响,为后续的乳腺癌CXCR4-siRNA基因显像奠定基础。方法人工设计合成三段针对CXCR4 mRNA的siRNA,同时设计出阴性对照序列,质体分别包裹三段干扰序列,转染MDA-MB-231细胞,24 h后进行PCR实验,检测CXCR4 mRNA的表达情况,在48 h后进行Western blot实验,检测CXCR4蛋白的表达,综合分析,选出最佳干扰序列。使用螯合剂HYNIC对干扰效果最好siRNA序列及siRNA(阴性对照)进行放射性^(99m)Tc标记,分别检测其标记率、放射性化学纯度、稳定性及干扰活性。多组间计量资料比较用方差分析进行比较,两组间计量资料比较用LSD-t检验进行比较。结果三段不同序列siRNA作用于MDA-MB-231细胞后,CXCR4 siRNA1作用后的CXCR4 mRNA及蛋白表达量减少的情况与其它两条干扰序列差异有统计学意义。^(99m)Tc-HYNICCXCR4 siRNA1的标记率为(61. 26±2. 47)%(n=5),阴性对照^(99m)Tc-HYNIC-CXCR4 siRNA的标记率为(60. 85±2. 76)%(n=5)。^(99m)Tc-HYNIC-CXCR4 siRNA1的稳定性好,放射性化学纯度均能达到90%。^(99m)Tc标记前后CXCR4 siRNA干扰活性无差别。结论 CXCR4 siRNA探针能与CXCR4 mRNA上的目的序列结合,抑制目的基因的表达。合成的探针分子稳定性好,具备活体乳腺癌显像的基础条件,有望为乳腺癌精准诊疗提供一条新路径。

主 题 词：靶向趋化因子受体4 siRNA MDA-MB-231细胞 脂质体2000 ^99mTc 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1000-1905.2018.03.002

馆 藏 号：203381568...