猪瘟疫苗毒株和流行毒株RT-nPCR检测方法的建立

作     者：吴旭锦 朱小甫 WU Xujin;ZHU Xiaofu

作者机构：咸阳职业技术学院畜牧兽医研究所动物疫病分子生物学诊断实验室陕西咸阳712000 

基　　金：陕西省科学技术研究发展计划(2014K02-06-03) 咸阳市科学技术研究计划(2014K02-21) 

出 版 物：《西北农业学报》 (Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica)

年 卷 期：2016年第25卷第3期

页      码：335-341页

摘      要：为给临床快速鉴别诊断猪瘟提供技术依据,根据GenBank公布的CSFV全基因序列,结合猪瘟序列测定结果,针对NS5B基因区域设计2条通用外扩引物、2条通用内扩引物和1条疫苗毒株特异性内扩引物,建立一种可鉴别猪瘟疫苗毒株和流行毒株的RT-nPCR诊断方法。结果显示,该方法可从HCLV株扩增出2条大小分别为261bp和157bp的片段,可从Shimen、SXYL2006、GX54和SD2002等流行毒株扩增出1条261bp的片段,其他几种常见猪病毒检测均呈阴性;灵敏度试验表明,检测的cDNA质量浓度极限为3.4×10-7 pg/L;116份临床样品中有37份样品检测呈阳性,阳性率为32%;分析部分阳性病料E2基因序列也证实检测结果的准确性。说明:建立的RT-nPCR鉴别诊断方法灵敏度高、特异性好,能直观区分猪瘟疫苗毒株和流行毒株。

主 题 词：猪瘟 反转录-复合套式聚合酶链式反应 鉴别诊断 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.7606/j.issn.1004-1389.2016.03.003

馆 藏 号：203382416...