单个细胞来源胎盘间充质干细胞培养方法的比较研究

作     者：孙宝航行 鲁奕 王怡沁 周嘉乐 林梦璐 宋玮 姜萌 卜军 SUN Bao-hangxing;LU Yi;WANG Yi-qing;ZHOU Jia-le;LIN Meng-lu;SONG Wei;JIANG Meng;BU Jun

作者机构：上海交通大学医学院附属仁济医院心内科上海200240 上海中医药大学附属曙光医院心血管科上海200021 

基　　金：国家自然科学基金(81270206 81470391) 上海市教育委员会高峰高原学科建设计划(20172014) 上海交通大学医工交叉Med-X基金(YG2014MS49)~~ 

出 版 物：《上海交通大学学报（医学版）》 (Journal of Shanghai Jiao tong University:Medical Science)

年 卷 期：2018年第38卷第9期

页      码：1033-1038页

摘      要：目的·观察胚胎来源间充质干细胞(placental derived mesenchymal stem cells,PMSCs)在人血小板裂解液(human platelet lysate,HPL)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,b FGF)及传统的胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)不同组合的培养基中的倍增数目及细胞性状,着重探索更合适的PMSCs培养体系。方法·分离单个细胞来源PMSCs,扩增后分别用 4 种培养基孵育,分为FBS 组、FBS+b FGF组、HPL组以及HPL+b FGF组。观察细胞形态及生长状态、细胞表型及多能分化。在P1、P2、P3、P4代进行计数。取P4代细胞接种,分析集落形成单位的个数。结果·经鉴定,PMSCs具有间充质干细胞的生物特性。数量上,FBS+b FGF组在P4代达到(1.12×10~7)个/cm^2,HPL组达到(1.24×10~7)个/cm^2(P>0.05),而FBS组和HPL+b FGF组则只有(5.58×10~6)个/cm^2和(8.56×10~6)个/cm^2。细胞形态上,FBS+b FGF组与HPL组 P4代的 PMSCs均保持贴壁生长,但HPL组细胞于P5代无法贴壁生长。细胞集落数量上,P4代时,FBS+b FGF组为51个/ 孔,HPL为52个/ 孔(P>0.05)。细胞生物学特性上,FBS+b FGF 组和HPL组在P4代时均能基本保有间充质干细胞的特性和多能分化的能力。结论·从细胞数量上来看,HPL组中的P4代细胞数与目前常用的FBS+b FGF培养基没有显著差异,且已达到临床治疗剂量需求;从细胞生物学特性上来看,HPL培养基与FBS+b FGF培养基均能基本保持PMSCs细胞特性和多能分化的能力。但由于HPL培养基免疫原性低,因此更适合临床移植应用。然而,由于HPL培养基无法维持PMSCs生长至5代以后,故无法用于大规模细胞扩增。HPL+b FGF在目前实验条件下并不具备优势。

主 题 词：胎盘来源间充质干细胞 细胞扩增 碱性成纤维生长因子 人血小板裂解液 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 1001[医学-基础医学] 100101[100101] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1674-8115.2018.09.006

馆 藏 号：203384425...