高糖通过诱导自噬障碍促进心肌细胞H9c2凋亡

作     者：方媛 郭统帅 吴岳 刘洋 曹瑜梦 雷新军 Fang Yuan;Guo Tongshuai;Wu Yue;Liu Yang;Cao Yumeng;Lei Xinjun

作者机构：西安交通大学第一附属医院心内科710061 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30900616) 

出 版 物：《中华细胞与干细胞杂志（电子版）》 (Chinese Journal of Cell and Stem Cell（Electronic Edition）)

年 卷 期：2018年第8卷第3期

页      码：134-139页

摘      要：目的探讨自噬对高糖(HG)诱导的心肌细胞H9c2凋亡的影响。方法 MTT法检测H9c2细胞活力;hoechst33258染色法检测凋亡细胞;Western Blot检测H9c2细胞促凋亡蛋白Bax和自噬相关蛋白(Beclin-1和P62)的表达。各组的OD值和蛋白条带灰度值均采用析因设计的方差分析,各组间差异用单因素ANOVA分析。结果 HG能诱导H9c2细胞活力降低:12、24、48 mmol/L的HG细胞活力分别为Control组(100﹪)的[(79.5±2.23)﹪](t=3.143,P=0.043)、[(54.6±3.08)﹪](t=12.425,P=0.000)和[(37.2±2.59)﹪](t=13.761, P=0.000);与Control组(100﹪)比较,甘露醇等渗对照组的细胞活力值为[(101.0±1.27)﹪](t=0.012,P=0.094)。HG诱导H9c2细胞hoechst33258阳性细胞增加,且能诱导促凋亡蛋白Bax表达增加:与Control组比较,12、24、48 mmol/L的HG处理组凋亡蛋白Bax/β-actin灰度值分别为(1.29±0.25,t=2.32,P=0.045)、(1.42±0.23,t=10.247,P=0.000)和(1.81±0.29,t=16.324,P=0.000)。HG诱导自噬障碍:与Control组比较,自噬相关蛋白Beclin-1/β-actin灰度值分别为(0.82±0.16,t=4.243,P=0.032)、(0.78±0.19,t=11.341,P=0.000)和(0.62±0.11,t=13.455,P=0.000),P62蛋白/β-actin蛋白灰度值分别为(1.29±0.25,t=4.442,P=0.014)、(1.42±0.23,t=13.341,P=0.000)和(1.81±0.29,t=15.851,P=0.000)。自噬诱导剂雷帕霉素可逆转HG诱导的hoechst33258阳性细胞增加,且逆转HG诱导的Bax表达升高:与Control组比较,HG组、HG和雷帕霉素共处理组、雷帕霉素组的Bax/β-actin灰度值分别为(1.51±0.31,t=14.342,P=0.000)、(1.42±0.23,t=9.621,P=0.004)和(1.81±0.12,t=0.172,P=0.124)。结论 HG可促进心肌细胞H9c2凋亡,且能诱导自噬障碍,自噬诱导剂的运用逆转了HG对H9c2细胞的凋亡作用,表明自噬障碍是HG诱导H9c2细胞凋亡的重要机制。

主 题 词：自噬 高糖 细胞凋亡 心肌细胞 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100201[100201] 10[医学] 

D　O　I：10.3877/cma.j.issn.2095-1221.2018.03.002

馆 藏 号：203384587...