特异性扩增技术鉴定龟甲与鳖甲

作     者：李楠 虞平添 焦兆群 陈立群 郑阳 黄学贵 陈红杰 蔡宝昌 杨欢 沈玉萍 

作者机构：镇江市食品药品监督检验中心江苏镇江212004 江苏大学药学院江苏镇江212013 南京海昌中药集团有限公司江苏南京210061 

基　　金：国家自然科学基金(81773855 81303174) 江苏省"六大人才高峰"(YY-010) 江苏省"青蓝工程"(2016) 江苏省自然科学基金(BK20150463) 中国博士后科学基金(2017T100338) 

出 版 物：《中成药》 (Chinese Traditional Patent Medicine)

年 卷 期：2018年第40卷第10期

页      码：2328-2333页

摘      要：目的基于特异性扩增建立动物药龟甲与鳖甲的真伪鉴定技术。方法根据龟甲与鳖甲及3种常见伪品的全基因组序列的差异设计了5对特异性引物(PCR、PTS、PMS、PPS、PAF),采用SDS法、酚仿抽提法从龟甲与鳖甲中提取与纯化DNA,并通过聚合酶链式反应(PCR)对目标片段进行扩增,产物以琼脂糖凝胶电泳分析及凝胶成像系统检测,并根据电泳条带的有无及分子量大小以鉴定真伪。结果龟甲与鳖甲及其常见伪品巴西龟、花龟、佛罗里达鳖的DNA经扩增后分别在120、120、81、105、114 bp处产生条带,且引物间无交叉反应,体现出很强的专属性,5个物种DNA的检出限为1 ng。自制药材、饮片、掺伪品均扩增出与目的片段相一致的条带。在市售样品中,18批龟甲和20批鳖甲经鉴定为正品,2批龟甲药材经鉴定为来源于巴西龟的伪品。结论本文所建立的技术可准确、快速地鉴定龟甲与鳖甲的真伪,有助于监控其产品质量。

主 题 词：龟甲 鳖甲 掺伪 特异性扩增 

学科分类：1008[医学-中药学类] 1006[医学-中西医结合类] 100602[100602] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1001-1528.2018.10.046

馆 藏 号：203384850...