牛副流感病毒3型实时荧光定量PCR检测方法的建立及在牛源样本检测中的应用

作     者：王吉 付瑞 李晓波 王淑菁 王莎莎 李威 秦骁 巩薇 岳秉飞 贺争鸣 WANG Ji;FU Rui;LI Xiao-bo;WANG Shu-jing;WANG Sha-sha;LI Wei;QIN Xiao;GONG Wei;YUE Bing-fei;HE Zheng-ming

作者机构：中国食品药品检定研究院国家实验动物微生物遗传检测中心北京100050 

基　　金：中国食品药品检定研究院学科带头人培养基金项目(2015X5) 

出 版 物：《中国病毒病杂志》 (Chinese Journal of Viral Diseases)

年 卷 期：2018年第8卷第5期

页      码：393-399页

摘      要：目的建立用于牛源性样本牛副流感病毒3型(BPIV3)实时荧光定量PCR (Q-PCR)快速检测方法。方法选择已发表的BPIV3 HN基因高度保守区域作为靶基因,设计合成引物和探针,建立BPIV3Q-PCR方法。并对方法的线性、特异性、敏感性、重复性、稳定性等进行方法学评价。同时用建立的Q-PCR方法检测105批次牛源性样本。结果建立的BPIV3Q-PCR方法线性范围为1×101拷贝/μl^1×108拷贝/μl;与牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛鼻气管炎病毒(BHV-1)、仙台病毒(SV)均无交叉反应;检测敏感度可以达到1.0×10~1拷贝/μl;3个不同浓度梯度标准品3次不同实验平均变异系数均小于5%。应用建立的方法检测105批次牛源性样本,BPIV3核酸阳性率为12.4%。结论建立的BPIV3QPCR检测方法线性关系良好,具有快速、特异、敏感及稳定的特点,可用于牛源性样本BPIV3的快速定量检测。

主 题 词：牛副流感病毒3型(BPIV3) 实时荧光定量PCR检测方法 牛源性样本 

学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

D　O　I：10.16505/j.2095-0136.2018.0050

馆 藏 号：203384902...