弓形虫ROP2基因的体外扩增及真核表达重组质粒的构建

作     者：吴昆 陈晓光 李华 支国舟 

作者机构：第一军医大学寄生虫学教研室广东广州510515 

基　　金：广东省科技计划项目(A1090205) 

出 版 物：《第一军医大学学报》 (Journal of First Military Medical University)

年 卷 期：2002年第22卷第7期

页      码：620-623页

摘      要：目的　构建弓形虫棒状体蛋白2（POP2）基因真核表达重组质粒。方法　根据ROP2基因已知序列,设计合成一对引物,上、下游引物分别引入EcoRI、SalI酶切位点,用PCR方法从弓形虫RH株基因组DNA中扩增编码ROP2的基因片段,插入pGEX-4T-1质粒,构建原核表达重组质粒pGEX-4T-1-ROP2,而后经EcoR　I、Not　I双酶切出ROP2基因片段,再亚克隆到载体pcDNA3中构建真核表达重组质粒pcDNA3-ROP2。结果　ROP2基因体外扩增产物大小约1043bp,重组质粒经酶切及PCR鉴定表明获得正确重组子,克隆基因测序结果与已知序列基本吻合。结论　在国内首次克隆了弓形虫ROP2基因并构建了真核表达质粒pcDNA3-ROP2,为下一步弓形虫DNA疫苗研究打下了基础。

主 题 词：弓形虫 ROP2基因 体外扩增 真核表达重组质粒 DNA疫苗 

学科分类：1001[医学-基础医学] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3321/j.issn:1673-4254.2002.07.014

馆 藏 号：203386579...