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响应面法优化紫球藻原生质体的制备

响应面法优化紫球藻原生质体的制备

作     者:蒲洋 丁涓 彭炜航 孙静 王艳华 Pu Yang;Ding Juan[2.];Peng Weihang;Sun Jing;Wang Yanhua

作者机构:鲁东大学农学院山东烟台264025 鲁东大学生命科学学院山东烟台264025 山东博华高效生态农业科技有限公司山东滨州256500 

基  金:山西省煤基重点科技攻关项目(FT2014-01) 鲁东大学科研启动基金(ly2014041) 

出 版 物:《山西农业大学学报(自然科学版)》 (Journal of Shanxi Agricultural University(Natural Science Edition))

年 卷 期:2018年第38卷第10期

页      码:31-36页

摘      要:[目的]优化紫球藻细胞原生质体制备条件。[方法]利用Box-Benhnken的中心组合实验设计,进行三因素三水平的实验设计。[结果]得到二次回归方程:Y=55.10+5.19X1-0.075X_2+1.76X_3-0.85X_1X_2-3.13X_1X_3-4.20X_2X_3-9.09X_1~2-6.66X_2~2-7.49X_3~2,确定了混合酶浓度(X1)、纤维素酶和果胶酶的比例(X2)和pH(X3)三因素对紫球藻原生质体制备率(Y)的组合效应,得到了混合酶浓度2.2%、纤维素酶与果胶酶体积比2∶3、pH 7、渗透压稳定剂为0.2mol·L-1 KCl、30℃下轻微振荡、酶解6h的最优制备条件,在此条件下得到68.5%的原生质体制备率。[结论]本研究提高了紫球藻原生质体的制备率,能够满足后续基因工程和遗传育种研究的需要。

主 题 词:紫球藻 原生质体制备 响应面分析 条件优化 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 07[理学] 0828[工学-建筑类] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D O I:10.13842/j.cnki.issn1671-8151.201808012

馆 藏 号:203387331...

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