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尿液中大肠埃希菌实时荧光定量聚合酶链反应检测方法的建立

尿液中大肠埃希菌实时荧光定量聚合酶链反应检测方法的建立

作     者:吴蓉 张隆 华玲 戴俊华 刘丽丽 康向东 WU Rong;ZHANG Long;HUA Ling;DAI Junhua;LIU Lili;KANG Xiangdong

作者机构:上海中医药大学附属普陀医院检验科上海200062 上海市浦东新区公利医院检验科上海200135 

出 版 物:《检验医学》 (Laboratory Medicine)

年 卷 期:2011年第26卷第6期

页      码:368-371页

摘      要:目的建立实时荧光定量聚合酶链反应(RQ—PCR)检测大肠埃希菌的方法,检测泌尿道感染患者尿液样本,评估应用RQ-PCR法在检测大肠埃希菌尿路感染的意义。方法选择大肠埃希菌β-右旋半乳糖苷酶基因作为检测靶基因设计引物,建立SYBRGREENIRQ—PCR检测体系。结果引物特异性好,标准曲线相关系数在0.990~0.996之间。熔解曲线显示产物特异性较强,无非目的条带和二聚体产生。在最低检测限(10^2拷贝/止)以上,能对大肠埃希菌样本进行检测,且重复性好。结论RQ—PCR是一种快速、敏感、特异、重复性好的定量检测大肠埃希菌质粒DNA方法,可用于定量检测临床患者尿液样本中大肠埃希菌含量。

主 题 词:大肠埃希菌 DNA 质粒 尿液 实时定量聚合酶链反应 

学科分类:1010[医学-医学技术类] 10[医学] 

D O I:10.3969/j.issn.1673-8640.2011.06.003

馆 藏 号:203388042...

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