基质金属蛋白酶-1 shRNA真核表达载体的构建

作     者：朱秀丽 朱晓英 郭青玉 王静 温德升 吴军正 ZHU Xiuli;ZHU Xiaoying;GUO Qingyu;WANG Jing;WEN Desheng;WU Junzheng

作者机构：武警总医院口腔科北京100039 第四军医大学口腔医院口腔生物教研室西安710032 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30371551) 

出 版 物：《武警医学》 (Medical Journal of the Chinese People's Armed Police Force)

年 卷 期：2012年第23卷第2期

页      码：111-114页

摘      要：目的构建基质金属蛋白酶-1(MMP-1)特异的RNA干扰质粒载体。方法根据GenBank数据库提供的MMP-1基因核苷酸序列,选择设计能转录短发夹状RNA(Short hairpin RNAs,shRNA)的DNA序列,并与pWH1质粒载体连接,用酶切的方法进行鉴定;将构建成功的特异性表达载体(pWH1-MMP1)稳定转染至人腺样囊性癌ACC-M细胞系后,应用RT-PCR、免疫组织化学及Western Blot对细胞MMP1的表达进行检测。结果在成功转染pWH1-ACC-M表达载体的ACC-M细胞中,MMP1 mRNA和蛋白的表达明显降低。结论成功构建了MMP1特异性shRNA表达载体,可有效地沉默MMP1基因,为进一步研究MMP1表达与腺样囊性癌增殖和转移的相关性奠定了一定的实验基础。

主 题 词：涎腺 腺样囊性癌 短发夹状RNA 真核表达载体 基质金属蛋白酶1 

学科分类：1001[医学-基础医学] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1004-3594.2012.02.006

馆 藏 号：203388363...