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7种动物冠状病毒特异基因的克隆与序列分析

7种动物冠状病毒特异基因的克隆与序列分析

作     者:李健 王巧全 陈沁 王权 张建武 熊炜 胡永强 LI Jian;WANG Qiao-quan;CHEN Qin;WANG Quan;ZHANG Jian-wu;XIONG Wei;HU Yong-qiang

作者机构:上海出入境检验检疫局上海200135 上海大学生命科学学院上海200436 中国农业科学院上海兽医研究所上海200032 

基  金:国家863项目(2003AA2Z2060) 

出 版 物:《畜牧与兽医》 (Animal Husbandry & Veterinary Medicine)

年 卷 期:2008年第40卷第2期

页      码:12-15页

摘      要:为了比较冠状病毒基因相关性,获得特异基因克隆制备冠状病毒基因芯片,根据发布的基因序列,每种病毒设计4-17对引物,利用火鸡冠状病毒(TCV)原毒和蔗糖密度梯度离心纯化浓缩的犬冠状病毒(CCV)、猫冠状病毒(FCV)、猫传染性腹膜炎病毒(FIPV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪呼吸道冠状病毒(PRCV)、牛冠状病毒(BCV)细胞毒,提取总RNA并反转录和PCR扩增。回收PCR产物连接pGEM-T-easy载体并转化大肠杆菌TGI,经PCR鉴定后测序。将所有基因片段的核苷酸序列和推导的氨基酸序列,分别与GenBank有关病毒相关基因片段的核苷酸序列进行分析比较,确定它们的同源性。通过对不同冠状病毒不同基因片段的克隆和测序,发现同一群冠状病毒核苷酸序列间具有较高的同源性。

主 题 词:冠状病毒 基因 克隆 序列分析 

学科分类:090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

馆 藏 号:203388574...

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