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猪附红细胞体MSG1部分基因片段的全基因合成及克隆表达

猪附红细胞体MSG1部分基因片段的全基因合成及克隆表达

作     者:陈甜甜 刘建柱 周栋 刘海涛 成子强 郭慧君 王振勇 张利 柴同杰 CHEN Tian-tian;LIU Jian-zhu;ZHOU Dong;LIU Hai-tao;CHENG Zi-qiang;GUO Hui-jun;WANG Zhen-yong;ZHANG Li;CHAI Tong-jie

作者机构:山东农业大学动物科技学院山东泰安271018 

基  金:中国博士后基金特别资助项目(200801417) 山东省博士后创新项目专项基金资助项目(200801001) 山东省博士后基金资助项目(76247) 山东省中青年科学家奖励基金资助项目(BS2009NY007) 

出 版 物:《中国兽医学报》 (Chinese Journal of Veterinary Science)

年 卷 期:2010年第30卷第7期

页      码:945-948页

摘      要:通过人工合成猪附红细胞体MSG1基因的编码序列,以提高目的基因在大肠杆菌中的高效表达。根据Gen-Bank注册的AM407404的544~942氨基酸序列,选择大肠杆菌偏爱的密码子,设计并合成了12条寡核苷酸片段。用重叠区扩增法(PAS)全基因合成MSG1部分目的基因,克隆入pjet1.2/blunt载体。经测序证实正确后,构建原核表达载体pET-28c/MSG1,并转化入大肠杆菌BL21(DE3)中,获得含重组表达质粒的转化子,IPTG诱导表达,并进行SDS-PAGE分析。测序、酶切鉴定等结果表明,表达载体构建成功,诱导表达后大约在16000的位置出现明显的蛋白条带。

主 题 词:猪附红细胞体 MSG1 重叠区扩增法 

学科分类:090601[090601] 1002[医学-临床医学类] 09[农学] 0906[农学-水产类] 100201[100201] 10[医学] 

核心收录:

D O I:10.16303/j.cnki.1005-4545.2010.07.022

馆 藏 号:203389225...

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