马铃薯腐烂茎线虫特异性分子检测技术研究

作     者：宛菲 彭德良 杨玉文 何月秋 WAN Fei;PENG De-liang;YANG Yu-wen;HE Yue-qin

作者机构：中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害国家重点实验室北京100193 云南农业大学农业生物多样性与病虫害控制教育部重点实验室昆明650201 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30370930) 国家“973”计划(2002CB111400) “十一五”国家科技支撑计划项目(2006BAD08A15 2006BAD08A14) 

出 版 物：《植物病理学报》 (Acta Phytopathologica Sinica)

年 卷 期：2008年第38卷第3期

页      码：263-270页

摘      要：本研究利用通用引物(rDNA1/rDNA2)研究了21个国内甘薯茎线虫(Ditylenchus destructor)群体和1个韩国马铃薯茎线虫(***)群体的rDNA-ITS序列,从21个国内群体中扩增出2个大小不同的ITS片段,分别约为940 bp和1 100 bp;经克隆、序列测定和分析比对发现其ITS区存在特异性差异,分别命名为A型和B型,其中18个群体DdTH、DdCL、DdJN、DdMY1、DdYX1、DdZZ、DdLN、DdDX1、DdFN、DdYX2、DDSX1、DdDX2、DdXY、DdLL、DdSX2、DdLY、DdMY2和DdPY的ITS扩增产物约为940 bp,称之为A型马铃薯腐烂茎线虫(940 bp),3个群体DdSH,DdTS,DdYS为B型马铃薯腐烂茎线虫(1 100 bp)。设计构建并筛选出A型和B型马铃薯腐烂茎线虫2对特异性引物DdS1/DdS2和DdL1/DdL2,分别扩增出A型马铃薯腐烂茎线虫、B型马铃薯腐烂茎线虫群体的特异片段252 bp和485 bp;引入D3A/D3B作为内标,设计出一步双重PCR检测技术;同时优化了检测体系和PCR反应程序。该技术具有较高的特异性和灵敏性,能快速、准确地检测出不同型的马铃薯腐烂茎线虫群体。

主 题 词：马铃薯腐烂茎线虫 双重PCR 特异性引物 

学科分类：09[农学] 0904[农学-动物医学类] 090401[090401] 

核心收录：

D　O　I：10.3321/j.issn:0412-0914.2008.03.007

馆 藏 号：203389234...