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南方鲇GK基因片段的克隆及序列分析

南方鲇GK基因片段的克隆及序列分析

作     者:李佳蔚 李英文 LI Jia-wei;LI Ying-wen

作者机构:重庆师范大学生命科学学院重庆市动物生物学重点实验室重庆400047 

基  金:重庆市自然科学基金(No.CSTC2007BB1229) 

出 版 物:《重庆师范大学学报(自然科学版)》 (Journal of Chongqing Normal University:Natural Science)

年 卷 期:2011年第28卷第5期

页      码:25-28页

摘      要:为从南方鲇(Silurus meridionalis)中扩增葡萄糖激酶(GK)基因,根据已报道的GK基因结构中的氨基酸保守区域,设计简并引物;从南方鲇肝胰脏中迅速抽提RNA,将扩增出的产物克隆到pMD18-T载体上并导入到大肠杆菌DH5α中;阳性克隆鉴定后测序。将测序得到的南方鲇GK基因与已知的GK基因进行核苷酸序列比较,结果表明其与鲤(Cyprinus carpio)的同源性较高,达到83%;将此基因片段与其他已知的GK基因做出进化关系的确定,用Phylip软件NJ bootstrap方法构建GK系统树,它与草鱼(Ctenopahryngodon idellus)、鲤、鲫(Carassius aura-tus)、翘嘴红鲌(Eruthroculter ilishaeformis)、虹鳟(Oncorhynchus mykiss)、大西洋鲑(Salmo salar)、金头鲷(Sparus au-rata)、黄易鲷(Rhabdosargus sarba)等以较高的支持度形成一个分支。本研究成功地从南方鲇肝胰脏中扩增到长度为688 bp的编码蛋白酶的基因片段,为今后克隆南方鲇GK基因全长序列及该基因在不同营养条件下的表达等研究奠定基础。

主 题 词:南方鲇 葡萄糖激酶 基因克隆 序列分析 

学科分类:07[理学] 08[工学] 

馆 藏 号:203392586...

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