鸡柔嫩艾美耳球虫表面抗原基因sag10在毕赤酵母中的表达及鉴定

作     者：韩德强 丁宏标 乔宇 索勋 郝永清 HAN De-Qiang;DING Hong-Biao;QIAO Yu;SUO Xun;HAO Yong-Qing

作者机构：中国农业科学院饲料研究所北京100081 中国农业大学动物医学院北京100094 内蒙古农业大学动物科学与医学学院呼和浩特010018 

基　　金：国家"863"计划课题(2003AA241160) 中国-丹麦政府间国际合作项目 

出 版 物：《寄生虫与医学昆虫学报》 (Acta Parasitologica et Medica Entomologica Sinica)

年 卷 期：2006年第13卷第4期

页      码：199-203页

摘      要：sag基因家族是制备基因工程疫苗重要的候选基因。本研究通过在毕赤酵母Pichiapastoris中表达柔嫩艾美耳球虫Eimeriatenella表面抗原基因sag10,来探讨sag10表达后的生物学活性。本文首先提取柔嫩艾美耳球虫北京株第2代裂殖子总RNA,根据GenBank报道序列(AJ586552)设计引物,应用RT-PCR技术扩增得到鸡球虫表面抗原sag10基因。然后将sag10与真核表达载体pPIC9K连接,构建了pDQ052分泌型真核表达质粒,并转化毕赤酵母GS115,利用G418抗性筛选多拷贝重组菌株,进行优化表达。SDS-PAGE和Westernblot检测表达结果,在43kDa处有明显的免疫印迹条带,表明目的蛋白得到表达,而且能被特异性抗体所识别,说明表达的SAG10蛋白具有生物学活性。

主 题 词：柔嫩艾美耳球虫 sag10 表达 毕赤酵母 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1005-0507.2006.04.002

馆 藏 号：203393833...