熔解曲线分析法用于RHD 1227G>A基因分型的实验研究

作     者：王霓 周世航 邵林楠 于卫建 张开立 刘铭 WANG Ni;ZHOU Shihang;SHAO Linnan;YU Wei-jian;ZHANG Kaili;LIU Ming

作者机构：大连市血液中心辽宁大连116001 大连医科大学细胞生物学教研室 

出 版 物：《中国输血杂志》 (Chinese Journal of Blood Transfusion)

年 卷 期：2018年第31卷第9期

页      码：953-956页

摘      要：目的建立用于RHD 1227G〉A基因分型的熔解曲线分析法。方法设计合成RHD 1227G〉A等位基因特异性引物和公共引物,并在2条等位基因特异性引物5＇端加上不同长度的GC序列。在实时PCR反应后,进行熔解曲线分析,依据PCR产物熔解温度的差异,对RHD 1227G〉A基因分型。将建立的熔解曲线分析法与常规的PCRSSP法比较。对于2种方法检测结果不符的标本,进行RHD基因第9外显子测序,确定该标本为RHD 1227G〉A基因型。结果应用熔解曲线分析法对84例标本进行基因分型,其中RHD 1227A＋/G-32例,1227A-/G＋22例,1227A＋/G＋6例,1227A-/G-24例。发现2例标本熔解曲线法检测的基因型为1227A＋/G-,而PCR-SSP法检测结果为1227A＋/G＋。经基因测序证实这2例标本结果是1227A＋/G-。结论用于RHD 1227G〉A基因分型的熔解曲线法具有操作简单、快速、准确等优点,优于常规的PCR-SSP法。

主 题 词：实时PCR 熔解曲线分析 D^(el) RHD基因 RHD 1227A等位基因 基因分型 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 1010[医学-医学技术类] 100215[100215] 10[医学] 

D　O　I：10.13303/j.cjbt.issn.1004-549x.2018.09.009

馆 藏 号：203393955...