实时聚合酶链反应检测O1群和O139群霍乱弧菌方法的建立及应用

作     者：王晓梅 王多春 谭海玲 钟豪杰 陈经雕 李柏生 柯昌文 闫梅英 张静 阚飙 WANG Xiao-mei;WANG Duo-chun;TAN Hai-ling;ZHONG Hao-jie;CHEN Jing-diao;LI Bai-sheng;KE Chang-wen;YAN Mei-ying;ZHANG Jing;KAN Biao

作者机构：中国疾病预防控制中心传染病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室 广东省疾病预防控制中心 中国疾病预防控制中心 

基　　金：国家"863"高技术研究发展计划课题资助项目(2006AA02Z425) 

出 版 物：《中华流行病学杂志》 (Chinese Journal of Epidemiology)

年 卷 期：2007年第28卷第8期

页      码：768-771页

摘      要：目的建立检测O1群和O139群霍乱弧菌的实时荧光聚合酶链反应(RT-PCR)方法并进行水体标本的检测评价。方法根据O1群和O139群霍乱弧菌O抗原编码基因rfb序列设计引物,利用SYBR Green染料,建立同时检测霍乱弧菌O1群和O139群的RT-PCR方法,对所建立的方法分别进行实验室内的灵敏度、特异性及重复性评价。采集河口水标本增菌后进行RT-PCR检测,与分离培养方法比较评价实际应用价值。结果建立了检测O1群和O139群霍乱弧菌的双重RT-PCR方法,根据扩增产物的溶解温度能有效区分O1群和O139群霍乱弧菌两种目标片段的扩增;对其他10种弧菌染色体DNA没有扩增;RT-PCR检测524份河口水体标本的增菌液,与常规分离方法相比显示了明显的灵敏性,并且所有常规分离方法阳性标本其荧光PCR检测亦为阳性。结论以O1群和O139群rfb基因为目标检测片段建立的霍乱弧菌RT-PCR方法可用于环境水体样本中霍乱弧菌常规分离前的快速筛查。

主 题 词：霍乱弧菌 实时聚合酶链反应 编码基因 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 1010[医学-医学技术类] 100215[100215] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3760/j.issn:0254-6450.2007.08.011

馆 藏 号：203394007...