***的学习记忆异常基因及其功能的研究

作     者：许锡振 吴利标 罗信国 赵彦 濮瀑 朱旭新 XU Xi-zhen

作者机构：汕头大学医学院第一附属医院神经内科汕头515041 汕头大学医学院第一附属医院分子生物学实验室汕头515041 中国科学院上海生命科学研究院 上海交通大学医学院健康科学研究所 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30470552) 

出 版 物：《中华行为医学与脑科学杂志》 (Chinese Journal of Behavioral Medicine and Brain Science)

年 卷 期：2009年第18卷第12期

页      码：1067-1070页

摘      要：目的探索学习记忆异常基因hab—1（cn308）的功能。方法1．在hab-1领域有Y63D3A．6、Y63D3A．7和Y63D3A．8等三个YAC克隆。在基因库里检索Y63D3A．6、Y63D3A．7和Y63D3A．8的cDNA序列，用DNASIS—Mac v3．6软件处理并设计引物，进行PCR。把PCR产物插入pMD^TM18-TVector载体，并培养提取Y63D3A．6、Y63D3A．7和Y63D3A．8的目的DNA，纯化DNA。2．进行rescue实验：把三种YAC克隆（clone）Y63D3A．6、Y63D3A．7和Y63D3A．8的DNA分别与GFP蛋白连接配制融合蛋白。应用OLYMPUS Axiovert S100共聚焦倒置显微镜操作系统，在心大小的***生殖腺（gonad）内分别把三种GFP融合蛋白溶液显微注射，发育传代至F1。在F1代选择带有GFP荧光的***，观察基因的表达部位，并进行Tap测试，通过观察在哪个YAC克隆把hab—1（cn308）的表现型恢复为野生型来确定hab-1的等位基因。***测序和同源性检索：hah-1的等位基因确定以后对cn308进行DNA测序。根据cn308的测序结果与已知的等位基因DNA序列进行Homology search，分析cn308的基因结构，并进行BLSTP homologic search，和其他物种比较目的基因的功能来阐明hab—1的基因功能。结果对Y63D3A．6、Y63D3A．7和Y63D3A．8等三种基因表达率进行χ^2检验结果表示差异有显著性（χ^2=26．84，P〈0．05）。表明Y63D3A．6、Y63D3A．7、Y63D3A．8等三种基因虽然连锁于第一常染色体上邻近的位置，但在***的头部表达率无关联性，并有显著性差异.同时可见Y63D3A．7强表达于***的头部，Tap测试证明Y63D3A．7把hab-1的表现型恢复野生型。DNA测序结果表明hab-1（cn308）是GAG错义突变为GGG，即Glu→Gly的突变体。BLSTP homologic search结果表明Y63D3A．7是调节线粒体complexⅠ的活性，就是说明hab-1基因与线粒体complexⅠ的功能有关。结论Y63D3A．7是hab-1的等位基因，主要表达于中枢神经系统。***的学习记忆机能低下与hab-1的突变影响线粒体complexⅠ的功能有关.

主 题 词：Tap刺激 hab-1 线粒体complex Ⅰ 学习记忆 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100204[100204] 10[医学] 

D　O　I：10.3760/cma.j.issn.1674-6554.2009.12.005

馆 藏 号：203394944...