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鲤浮肿病毒和锦鲤疱疹病毒双重实时荧光定量PCR检测方法的建立

鲤浮肿病毒和锦鲤疱疹病毒双重实时荧光定量PCR检测方法的建立

作     者:张文 徐立蒲 吕晓楠 王小亮 曹欢 王姝 王静波 ZHANG Wen;XU Lipu;LYU Xiaonan;WANG Xiaoliang;CAO Huan;WANG Shu;WANG Jingbo

作者机构:北京市水产技术推广站 

基  金:北京市农业局科技新星计划项目(项目号:20180212),题目:KHV和CEV双重PCR建立及应用 北京市创新团队(项目号:BAIC03-2018),题目:北京市观赏鱼产业创新团队 

出 版 物:《病毒学报》 (Chinese Journal of Virology)

年 卷 期:2018年第34卷第6期

页      码:889-895页

摘      要:为了建立可同时检测鲤浮肿病毒(Carp edema virus,CEV)和锦鲤疱疹病毒(Kio herpesvirus,KHV)的检测方法,本研究根据CEV P4a基因保守序列,对英国环境、渔业水产养殖研究中心(Center for Environment,Fisheries and Aquaculture Science,CEFAS)设计合成的引物序列进行优化,合成1对特异性引物和1条用FAM荧光基团标记的TaqMan探针;根据KHV ORF7基因保守序列,设计筛选1对特异性引物和1条用VIC荧光基团标记的TaqMan探针。优化反应条件,建立了CEV和KHV双重实时荧光定量PCR检测方法。结果显示该方法特异性强,与其它水生动物病毒无交叉反应;灵敏度高,对CEV和KHV的检测限均为15拷贝数/μL;组内重复与组间重复的平均变异系数小于3%。本研究建立的方法具有快速、特异、敏感等优点,可用于CEV和KHV的快速检测。

主 题 词:鲤浮肿病毒(CEV) 锦鲤疱疹病毒(KHV) 双重实时荧光定量PCR 

学科分类:090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录:

D O I:10.13242/j.cnki.bingduxuebao.003470

馆 藏 号:203395081...

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