猪非典型性瘟病毒与猪流行性腹泻病毒双重PCR方法的建立与应用

作     者：杨晓宇 徐雷 殷鑫欢 张继宗 徐志文 朱玲 YANG Xiao-yu;XU Lei;YIN Xin-huan;ZHANG Ji-zong;XU Zhi-wen;ZHU Ling

作者机构：四川农业大学动物医学院四川成都611130 四川农业大学动物疫病与人类健康四川省重点实验室四川成都611130 

基　　金：四川省科技支撑计划项目(2017NZ0038) 四川省"十三五"育种攻关项目(2016NYZ0052) 国家"十二五"科技支撑计划项目(2015BAD12B04-2.3) 

出 版 物：《江苏农业学报》 (Jiangsu Journal of Agricultural Sciences)

年 卷 期：2018年第34卷第5期

页      码：1081-1086页

摘      要：为了快速准确地检测出猪非典型性瘟病毒(APPV)与猪流行性腹泻病毒(PEDV),根据Gen Bank中发布的PEDV S2基因和APPV NS3基因的序列,分别选取PEDV S2基因和APPV NS3基因的保守序列,设计、合成了1对特异性引物。通过对体系进行优化,分别扩增出190 bp和500 bp的特异性片段。建立的双重RT-PCR方法对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪轮状病毒(RV)的检测均为阴性。对PEDV和APPV的最低检出量分别为1μl 2.65×10~5和1μl 3.56×10~4,对四川遂宁、眉山等地采集到的腹泻、肌肉震颤的病料进行检测,PEDV、APPV阳性病料检出率分别为41. 18%和11. 76%,经分别与特异性检测APPV和PEDV的单一RT-PCR法检测结果进行比较分析,符合率均为100%。与单一RT-PCR检测方法具有相同特异性和重复性,可用于临床检测。

主 题 词：猪非典型性瘟病毒 猪流行性腹泻病毒 双重RT-PCR 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1000-4440.2018.05.016

馆 藏 号：203395134...