DF3启动子调控的hTERT基因RNAi载体的构建及靶向干扰效果的鉴定

作     者：曾永秋 赵矫 刘岚 陈绍坤 余红 税青林 

作者机构：泸州医学院医学生物学与遗传学教研室四川泸州646000 

基　　金：四川省科技厅资助项目(04JY029-020-1) 

出 版 物：《泸州医学院学报》 (Journal of Luzhou Medical College)

年 卷 期：2011年第34卷第5期

页      码：521-525页

摘      要：目的:构建带有肿瘤特异性DF3启动子、针对hTERT基因的RNA干扰表达载体pGenesil-10-miR30-DF3-hTERT,探讨该表达载体的肿瘤靶向性基因抑制作用。方法:分别用针对hTERT基因的RNA干扰寡核苷酸序列及DF3启动子取代质粒pGenesil-10-Micro30中原有的miR30序列及CMV启动子,构建pGenesil-10-miR30-DF3-hTERT载体并进行酶切及测序鉴定。将该载体分别转染人乳腺癌MCF-7细胞、肝癌HepG2细胞及造血干细胞,ELISA法检测hTERT蛋白的表达情况。结果:重组质粒经酶切及测序鉴定证实符合设计要求,构建成功。ELISA法检测结果显示,实验组MCF-7细胞及HepG2细胞的hTERT蛋白下降显著(P0.05)。结论:DF3启动子调控的hTERT基因的RNA干扰表达载体能有效抑制DF3阳性肿瘤细胞中hTERT的表达,以乳腺癌细胞效果最为显著,而对端粒酶阳性的正常细胞不产生影响。

主 题 词：DF3启动子 hTERT基因 RNA干扰 肿瘤特异性 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 1002[医学-临床医学类] 07[理学] 071007[071007] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1000-2669.2011.05.017

馆 藏 号：203395639...