牛新孢子虫二温式PCR检测方法的建立与应用

作     者：季新成 王文 牛国辉 郑培 张玲 JI Xin-cheng;WANG Wen;NIU Guo-hui;ZHENG Pei;ZHANG Ling

作者机构：新疆出入境检验检疫局新疆乌鲁木齐830063 新疆动物防疫监督总站新疆乌鲁木齐830060 新疆计量测试研究院新疆乌鲁木齐830011 

基　　金：国家质量监督检验检疫总局科研项目(2009IK011) 

出 版 物：《动物医学进展》 (Progress In Veterinary Medicine)

年 卷 期：2011年第32卷第8期

页      码：17-20页

摘      要：根据已发表的犬新孢子虫种属特异性基因片段Nc-5基因序列设计合成一对特异性引物,采用均匀设计方法对引物浓度、Mg2+浓度、dNTP、Taq酶和退火温度进行了优化,建立了检测牛新孢子虫的二温式PCR方法。该方法对牛新孢子虫DNA的检测灵敏度为23.5 fg/反应。应用该方法对50份全血和8份流产胎儿样本进行了检测,有3份全血和1份流产胎儿样本为阳性。与三步法PCR相比较,该二温式PCR方法检测时间缩短了30 min,且方法具有快速、灵敏、准确、特异等优点,可用来对牛新孢子虫病的检测。

主 题 词：新孢子虫 二温式PCR 均匀设计 牛 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 090601[090601] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 0906[农学-水产类] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1007-5038.2011.08.004

馆 藏 号：203395648...