鸭源鸡杆菌双重PCR检测方法的初步建立

作     者：皇甫和平 杨霞 赵军 王川庆 陈陆 常洪涛 王新卫 刘红英 姚慧霞 

作者机构：河南农业大学禽病研究所河南郑州450002 郑州牧业工程高等专科学校河南郑州450011 

基　　金：柏林格公司(BIV S.A.de C.V.项目合同编号43006167) 国家自然科学基金(30972187) 

出 版 物：《中国预防兽医学报》 (Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine)

年 卷 期：2013年第35卷第8期

页      码：640-643页

摘      要：为建立鸭源鸡杆菌(***)双重PCR检测方法,并对鸡杆菌分离株进行种类鉴定,本研究根据GenBank中*** 12656-12株的gtxA基因序列设计一对PCR引物,合成扩增rpoB基因的引物作为内参基因,建立了***双重PCR检测方法。检测结果显示:以*** Yu-PDS-RZ-1-SLG株DNA为模板进行的双重PCR检测能够扩增出两条目的片段;其它16株细菌包括副鸡禽杆菌、多杀性巴氏杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌、福氏志贺菌和奇异变形杆菌均只扩增出了一条目的片段;该方法可以检测到浓度为6.5×102cfu/mL的***;34株鸡杆菌分离株均扩增出了两条预期大小的目的片段。此外,序列分析结果表明,10株鸡杆菌河南分离株的rpoB基因序列与鸭源鸡杆菌种参考株(CCUG 15563)的同源性最高(97.5%～99.0%),属于鸭源鸡杆菌种。本研究建立的***双重PCR检测方法,可用于含gtxA基因鸡杆菌菌株的鉴定及临床病原学诊断。

主 题 词：鸭源鸡杆菌 双重PCR gtxA基因 rpoB基因 同源性分析 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1008-0589.2013.08.09

馆 藏 号：203396603...