生物质降解菌系中GH11家族耐热木聚糖酶基因的克隆与鉴定

作     者：郑宏臣 孙明哲 裴海生 孟令彩 曾文惠 张京声 刘逸寒 路福平 孙君社 

作者机构：农业部规划设计研究院北京100125 天津科技大学生物工程学院天津300457 中国农业大学食品科学与营养工程学院北京100083 

基　　金：国家自然科学基金项目(21176247 31101219) 国家863计划(2013AA102106) 中国博士后科学基金面上项目(2013M540076) 

出 版 物：《食品与发酵工业》 (Food and Fermentation Industries)

年 卷 期：2013年第39卷第11期

页      码：12-17页

摘      要：以玉米芯粉为基质富集培养牛粪中生物质降解菌系,提取该降解菌系的宏基因组DNA,并以其为模板,通过简并引物PCR扩增出200bp左右的木聚糖酶基因片段,选择与耐热木聚糖酶相似性最高且丰度最高的基因序列,应用mTAIL-PCR扩增得到1 059bp的基因全长序列(xynHAD4),编码352个氨基酸,经序列比对分析,该木聚糖酶(XynHAD4)属于典型的GH11家族木聚糖酶,与来源于Dictyoglomus thermophilum的xylanase229B相似度为93%。将xynHAD4连接于表达载体pET22b(+),在*** BL21中成功得到表达,表达产物经纯化后,测定其分子质量约为36kDa,最适作用温度和pH分别为80℃和6.0,该酶在90℃保温1h,残余酶活为72%,pH作用范围较广,在pH4.0保存1h,残余酶活为82%,可见,XynHAD4属于耐热木聚糖酶,并且在酸性条件下可保持较高稳定性,在食品、饲料等领域具有潜在的应用价值。

主 题 词：生物质 宏基因组 mTAIL-PCR 耐热木聚糖酶 基因表达 酶学性质 

学科分类：0832[0832] 08[工学] 083201[083201] 

核心收录：

D　O　I：10.13995/j.cnki.11-1802/ts.2013.11.019

馆 藏 号：203396765...