大鼠Egr-1探针的制备及应用

作     者：郑燕珊 郑付春 李伟秋 徐涵 张艳美 

作者机构：汕头大学医学院药理学教研室广东汕头515041 汕头大学医学院第一附属医院药剂科广东汕头515041 汕头大学医学院分析细胞学实验室广东汕头515041 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(81072633) 中央财政支持地方高校发展专项资金 

出 版 物：《汕头大学医学院学报》 (Journal of Shantou University Medical College)

年 卷 期：2014年第27卷第1期

页      码：18-21页

摘      要：目的:制备大鼠早期生长反应基因(Egr)-1分子探针,为进一步应用其研究Egr-1在病变组织的表达奠定基础。方法:提取大鼠心肌组织总RNA,PCR扩增基因片段,克隆入pGEM-T Easy载体,行酶切和基因测序。用随机引物DNA标记法制备α-32P标记的Egr-1和β-actin探针。Northern blot和Western blot法分析验证探针的信号强度及特异性。结果:PCR扩增所得目的基因片段大小与理论预期一致,测序证实获得基因序列与实验设计吻合。Northern blot显示该探针可检测心肌组织中目标mRNA水平,Western blot法检测到大鼠心肌组织中Egr-1蛋白的存在。结论:本研究成功制备大鼠Egr-1 cDNA探针,可用于进一步研究Egr-1与相关心血管疾病病理机制的关系。

主 题 词：探针 早期生长反应基因-1 心肌组织 基因 大鼠 

学科分类：1007[医学-药学类] 1006[医学-中西医结合类] 100706[100706] 100602[100602] 10[医学] 

D　O　I：10.13401/j.cnki.jsumc.2014.01.007

馆 藏 号：203396913...