同时检测PRRSV美洲型经典株、变异株和TJM-F92疫苗株的多重TaqMan荧光定量RT-PCR方法的建立及应用

作     者：施开创 官家明 胡杰 李凤梅 莫胜兰 陈汉忠 李军 SHI Kai-chuang;GUAN Jia-ming;HU Jie;LI Feng-mei;MO Sheng-lan;CHEN Han-zhong;LI Jun

作者机构：广西动物疫病预防控制中心广西南宁530001 广西大学动物科学技术学院广西南宁530005 

基　　金：广西科学基金项目(桂科青0832057) 

出 版 物：《中国预防兽医学报》 (Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine)

年 卷 期：2014年第36卷第6期

页      码：453-457页

摘      要：为建立猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的快速鉴别检测方法,本研究针对PRRSV美洲型经典株、变异株及弱毒活疫苗TJM-F92株的基因序列差异,设计了2对特异性引物和3条TaqMan探针,经过反应条件的优化,建立了能够同时检测并区分PRRSV美洲型经典株、变异株及TJM-F92疫苗株的多重TaqMan荧光定量RT-PCR方法。结果显示,该方法具有特异性强、敏感性高、重复性好的特点,与猪其他常见病毒无交叉反应;经典株、变异株、TJM-F92疫苗株重组质粒标准品的检出下限均为2.68拷贝/μL,比常规PCR敏感100倍;组内及组间重复试验的变异系数均小于1.5%。此外,该方法对324份疑似PPRSV感染的临床样品进行检测,结果显示PRRSV阳性114份,其中美洲型变异株105份、经典株6份、TJM-F92疫苗株3份,变异株和经典株混合感染4份。本研究建立的多重TaqMan荧光定量RT-PCR方法可以为PRRSV美洲型野毒株、疫苗株的快速鉴别检测及流行病学调查提供有效的技术手段。

主 题 词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 美洲型病毒株 TJM—F92疫苗株 多重TaqMan荧光定量RT—PCR 检测方法 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1008-0589.2014.06.09

馆 藏 号：203396971...