R262K点突变将紫穗槐二烯合酶变为(3R)-(E)-nerolidol合酶
作者机构：河北大学生命科学学院河北保定071002 河北大学药学院河北保定071002
基 金：国家自然科学基金青年基金项目(30900111 31300056) 河北大学博士后资助项目
出 版 物：《河北农业大学学报》 (Journal of Hebei Agricultural University)
年 卷 期：2015年第38卷第3期
页 码：12-18页
摘 要：倍半萜合酶家族催化单一底物法尼基焦磷酸形成近300多种链式、单环、双环和三环倍半萜烯、醇,进一步的加工修饰产生种类更加繁多的倍半萜衍生物。详细了解倍半萜合酶产物特异性性决定机制将会为倍半萜合酶的理性设计,定向生成新型化合物打下基础。本研究利用定点突变技术,对紫穗槐二烯合酶RxR基序及相关的D300位点进行了点突变,发现保守基序中R262K单点突变后其酶促反应主产物为(3R)-(E)-nerolidol,而R262L突变使酶失去活性,R264K突变则对产物比例无影响,显示保守基序中第一个精氨酸在活性中心疏水环境的维持中非常关键。D300突变结果显示此氨基酸对酶的活性维持非常必要,结合R262突变结果,推测R262和D300间的非键相互作用对酶活性的维持起重要作用。由于RxR基序在倍半萜合酶家族中非常保守,因此其作用是否具有普遍性值得进一步验证。
主 题 词：倍半萜合酶 紫穗槐二烯合酶 (3R)-(E)-nerolidol合酶 定点突变 产物特异性
学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102]
D O I：10.13320/j.cnki.jauh.2015.0052
馆 藏 号：203397517...
